martes, 30 de octubre de 2012

2.3.4 Siembra del explante


Después de esterilizar los medios MS y los materiales que se utilizaran se procede a la siembra de explantes en la cámara de flujo laminar, la cual se desinfecta con anterioridad para evitar contaminación del medio.
se lavan  bien las manos con agua y con jabon para después desinfectar con alcohol de 96° y  se meten en la cámara de flujo laminar mientras alguien mas corta los explantes para después llevarlos a la cámara de flujo laminar en un frasco, al que se le coloca la mitad de agua destilada y la otra mitad de cloralex, esto para desinfectar a los explantes se dejan desinfectando durante 5 min, después se hacen dos lavados  el primero de un minuto y el segundo de 5 minutos. Se coloca el mechero de alcohol encendido en la cámara de flujo laminar, en un frasco vacio esteril se colocan las pinzas y el bisturí  los cuales se estarán desinfectando cada vez que se ocupen, la desinfección se realiza remojando el material (pinzas y bisturí) en alcohol de 70° y después exponerlo al fuego directo y se coloca en el frasco vació para continuar con la siembra.
Para la siembra se corta la orilla inferior del explante ya que con el cloralex se quema y muere una pequeña porción del explante, se toma con las pinzas desinfectadas para depositarlo en el frasco con el medio MS este frasco se destapa y se mantiene la tapadera entre los dedos al igual que el frasco sin tocar el interior de ambos, sin meter los dedos en el interior del frasco se coloca el explante sobre el medio de cultivo tratando de que este quede poco sumergido y con la punta hacia arriba.
Una vez terminada la siembra se tapan y sellan los frascos para ser llevados al área de crecimiento 

BIBLIOGRAFIA 

Juan J. C. et al, 2012. Practica N° 3 siembra de explantes en medios MS

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