sábado, 13 de octubre de 2012

2.1.5.Preparacion y manejo de soluciones stock y 2.1.6 preparacion de medios de cultivo

MODO DE PREPARACIÓN DE SOLUCIONES STOCK



               Componentes de soluciones madres o stock
Componente
Cantidad en mg/l
NH4NO3
1650
KNO3  
1900
CaCl2.2H2O
440
MgSO4.7H2O
370
KH2PO4
170
Na2 EDTA
37.3
FeSO4.7H2O
27.8
H3BO3
6.2
MnSO4.4H2O
22.3
ZnSO4.7H2O
8.6
KI
0.83
Na2MoO4.2H2O
0.25
CuSO4.5H2O
0.025
CoCl2.6H2O
0.025
Glicina
2.00
Tiamina - HCl
0.10
Piridoxina – HCl
0.50
Acido Nicotinico
0.50
MyoInositol
100
Sacarosa
30000
Agar-Agar
6000


METODOLOGIA
·        Realizar los cálculos para preparar la solución de sulfatos en volumen de 200ml a 100X de los siguientes reactivos:
o   MgSO47 H2O, MnSO44H2O, ZnSO47H2O Y CuSO4


RESULTADOS
a)      CALCULO DE LAS CONCENTRACIONES DE SULFATOS PARA PREPARAR EN 200 ML.
Reactivos
ü  Mg SO4 . 7 H2O……370mg/l
ü  Mn SO4 . 4 H2O……22.3mg/l
ü  Zn SO4 . 7 H2O…….8.6mg/l
ü  Cu SO4 . 5 H2O.……0.025mg/l

Operación para calcular el Mg SO4 . 7 H2O
1. - Mg SO4 . 7 H2O: (370 mg/L) (100x): 37,000mg/l
Esto es a 1 concentración de 1L, pero se busca aforar a 200 ml. Entonces:
(37,000 mg/L) (200 ml) / 1000 ml: 7400mg/200ml               
Ahora se debe convertir a (g):
(7400 mg/ 200 ml) (1 g) / 1000 mg: 7.4g/200ml                   

Operación para calcular Mn SO4 . 4 H20
1. - Mn SO4 . 4 H2O: (22.3 mg/L) (100x):  2230mg/l
Esto es a 1 concentración de 1L, pero se busca aforar a 200 ml. Entonces:
(2230 mg/L) (200 ml) / 1000 ml: 446mg/200ml
Ahora se debe convertir a (g):
(446 mg/ 200 ml) (1 g) / 1000 mg: 0.446g/200ml

Operación para calcular Zn SO4 . 7 H20
1. - Zn SO4 . 7 H2O: (8.6 mg/L) (100x): 860mg/l
Esto es a 1 concentración de 1L, pero se busca aforar a 200 ml. Entonces:
(860 mg/L) (200 ml) / 1000 ml: 172mg/200ml                       
Ahora se debe convertir a (g):
(172 mg/ 200 ml) (1 g) / 1000 mg: 0.172g/200ml
Operación para calcular Cu SO4 . 5 H20
1. - Cu SO4 . 5 H2O: (0.025 mg/L) (100x): 2.5mg/l
Esto es a 1 concentración de 1L, pero se busca aforar a 200 ml. Entonces:
(2.5 mg/L) (200 ml) / 1000 ml: 0.5mg/200ml                         
Ahora se debe convertir a (g):
(0.5 mg/ 200 ml) (1 g) / 1000 mg: 0.0005g/200ml
b)      PESAJE DE LOS MATERIALES CALCULADOS.
Ya después de haber calculado se procedió a pesar las cantidades en la balanza analítica, se equilibro la balanza para el pesaje, se utilizo papel aluminio para verter los ingredientes cuando se esté pesando.

c)      DISOLUCIÓN DE LOS INGREDIENTES PESADOS.

     

Los ingredientes se disolvieron por separado en un vaso de precipitado,  el Cu SO4 . 5 H2O, debido a que no se calculo exactamente la cantidad deseada que era de 0.0005g, ya que se obtuvo 0.0064g, para obtener la concentración correcta el Cu SO4 . 5 H2O se disolvió en 10 ml de agua destilada, ya que se disolvió completamente, se hizo una regla de 3.
(0.0005g Cu SO4 . 5 H2O) (100ml) / (0.0064g Cu SO4 . 5 H2O): 0.781 mililitros


Materiales
•        Probeta graduada
•        Matraz erlenmeyer
•        Vaso de precipitado
•        Micropipeta
•        Pipeta
•        Agua destilada
•        Reactivos ya pesados

 Esta es la cantidad que se utilizaría para agregar completamente a la solución con los demás reactivos, en el vaso de precipitado. Se utilizó una Micropipeta para obtener los 0.781 mililitros y poder verterlo  en un vaso de precipitado.


Ya que se obtuvo la cantidad correcta, se agrego al vaso de precipitado; todos los ingredientes se agregaron en una cantidad de 100 ml. Después se agrego en una probeta graduada para poder ser aforada hasta los 200 ml.
Ya aforada la solución stock a 200 ml, se vertió nuevamente en el vaso de precipitado, para medir exactamente si estaba el volumen correcto de la solución stock. Después se agregaría en el recipiente donde se guardaría para ser refrigerado a 4 °C.
Después de haber agregado la solución stock en el envase de vidrio, se procedió a esterilizar en el autoclave.

Estos son los pasos ke se siguen para la formulacion de soluciones stock.


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