3.4. Técnicas In Vitro aplicadas al fitomejoramiento

• Cultivo de meristemos
•  Cultivo de suspensiones de células vegetales
•  Cultivo de protoplastos
•  Cultivo de anteras
• Cultivo de óvulos y embriones

3.3.7. Aplicación agronómica

Las cultivos de suspensiones vegetales tienen un amplio rango de aplicaciones

constituyendo una técnica muy valiosa en los estudios sobre:

1) la regulación del ciclo celular

2) la replicación del ADN y la síntesis de proteínas

 3) la transferencia de material genético

 4) la absorción y transporte de nutrientes

5) los diferentes eventos metabólicos

 6) la producción de metabolitos de interés en las industrias alimenticias, de fragancias y farmacéuticas

 7) el aislamiento y la selección de mutantes

8) los procesos de diferenciación y desarrollo de los embriones resultantes de la embriogénesis somática

BIBLIOGRAFIA

http://sedici.unlp.edu.ar/bitstream/handle/10915/2211/4_-_Cultivo_in_vitro.pdf?sequence=6

3.3.6. Factores que ayudan a incrementar la posibilidad de obtener plantas libres de patógenos

El empleo de explantos que se encuentran expuestos a bajos niveles de patógenos puede resolver el problema de la contaminación por hongos y bacterias durante el establecimiento del cultivo in vitro. Los factores que influyen sobre la calidad del explanto son:  

• El tipo de órgano que sirve como explanto
•   La edad ontogénica y fisiológica del mismo
•   La estación en la cual se colecta el material vegetal
•   El tamaño
•   El estado sanitario general de la planta donante.

La planta donante debe elegirse sobre la base de una selección masal positiva para las características agronómicas deseables. Una vez seleccionados los individuos, es preciso definir el tipo de explanto a establecer en condiciones in vitro.

3.3.5. Microinjerto

El microinjerto es una técnica que fue desarrollada en España para la obtención de plantas de citrus libres de virus y se basa en la injertación de un ápice meristemático so-bre una plántula de un patrón criado en condiciones asépticas. La técnica comprende los siguientes pasos:

1. Preparación del patrón: Se pelan las semillas y se siembran los embriones separados en medio de cultivo estéril. Una vez germinados, se corta transversalmente el epicótilo y se le hace una pequeña incisión longitudinal en el borde del corte, de esta manera se abre levemente la corteza.

2. Preparación de la púa: Se pueden extraer del campo brotes terminales tiernos de 5 cm. o más comúnmente varetas con yemas que se las hace brotar en laboratorio de los que se toma el ápice de 0,5 cm., de éste, previamente desinfectado se toma alrededor de1/10 de mm. del extremo que se coloca en la abertura del patrón.

3. Cultivo in Vitro de la planta injertada: Las plantitas se cultivan en medio líquido en tubos de ensayo con un soporte, se obtiene de un 30 a un 50 % de prendimiento de injerto y en un mes tienen un par de hojas desarrolladas y están listas para el paso siguiente.

4. Injerto sobre un plantín de vivero: Sobre un plantín de un portainjerto vigoroso, criado en invernáculo, se injerta la pequeña plantita extraída del tubo de ensayo. El método consiste en hacer un corte en T en el patrón y un bisel largo en la planta microinjertada a la altura del cuello del portainjerto que se inserta en el corte del portainjerto, se ata con cinta plástica y se practica un “looping”. Para la sobrevivencia de la plantita es necesario cubrir todo con una bolsa plástica para garantizar una cámara húmeda, más adelante se irá rusticando abriendo de a poco la bolsa haciendo cortes en la parte superior.

BIBLIOGRAFIA

http://es.scribd.com/doc/18009325/38/MICROINJERTO-Concepto-Tecnica-operatoria#outer_page_55